凱氏定氮法是目前測定食品和飼料中氮和蛋白質(zhì)含量常用的方法，具有較高的精密度和重現(xiàn)性，且應用簡單。現(xiàn)代凱氏定氮法是在400℃以上的消化溫度下，在硫酸和硫酸鹽的沸騰混合物中催化支持有機物質(zhì)礦化的過程。在此過程中，有機結合氮轉(zhuǎn)化為硫酸銨。堿化消化后的溶液釋放出氨氣，氨氣經(jīng)定量蒸汽蒸餾后用滴定法測定。

樣  品：

液態(tài)牛牛奶，全脂及巴氏殺菌

蛋白標簽值:3.35 g/100 ml，文獻中酪蛋白含量:2.66%

儀  器： 意大利VELP凱氏定氮儀 UDK 159 +消化爐DKL 20

實驗結果：

     以濾液(V濾液)體積乘0,4為樣本量，計算非酪蛋白氮(NCN)的結果為氮的百分比。其計算公式如下:NCN% = mg N / [(G milk/V sol) x 1000 x V filtrate] x 100

      G牛奶=牛奶重量(20克)

      V sol= 含所有分離所需化學物質(zhì)的牛奶溶液，容量(50毫升)

      V濾液=用于進行1分析的濾液(ml)

對全脂牛奶的修正系數(shù)0.994(半脫脂牛奶的修正系數(shù)為0.998)進行了輸出和相乘。計算酪蛋白時考慮到全脂牛奶中測定的總氮含量(Ntot)為0.525%。(關于Ntot，請參閱應用說明“牛奶中N/蛋白含量測定采用凱氏定氮法")

    以含28 mg氮的5 ml甘氨酸標準溶液(3%)為對照品，對整個過程進行驗證。所得回收率在98% ~ 102%之間，符合預期范圍。所得結果與預期值相符，可靠，重現(xiàn)性好，相對標準偏差低(RSD < 1%)，結果重復性好。

研究意義：

   酪蛋白含量由牛奶中總氮(Ntot)含量與非酪蛋白氮(NCN)含量的差值決定，該差值按本文所述程序計算。 牛奶蛋白是古老和廣泛食用的食物蛋白。目前，人們對這些物質(zhì)在營養(yǎng)領域和技術應用方面都有很大的興趣。酪蛋白是一種參與奶酪和發(fā)酵牛奶生產(chǎn)的蛋白質(zhì)家族。它們不僅是乳制品生產(chǎn)中非常重要的氮化合物，而且是醫(yī)藥中的添加劑，在化妝品、油漆和粘合劑中都有技術用途。